大学堂论文网致力于各类论文代写、论文发表、论文修改、论文查重等论文服务！客服QQ：82274534

沼液是人畜粪便以及作物秸秆等各种有机物混合发酵而成，含有丰富的N、P、K、氨基酸、蛋白质、核酸和糖类有机无机营养物质，而这些物质可以被植物直接或经转化吸收，对提高作物产量和改善土壤理化性质都有积极作用，是一种优质的有机肥[1-3].

　　Singla等[4]对谷物施用沼液和化肥后发现，两者均能提高小麦产量，但前者的总产量更高。

　　狼尾草属牧草Pennisetum是多年生禾本科牧草，生长于热带、亚热带地区，具有抗逆性强、少病虫害、适口性好的特点，可作为青饲料饲喂畜禽[5].合理施肥对提高狼尾草品质和产量有着重要影响。黄勤楼等[6]研究表明，在一定的施氮量范围内，杂交狼尾草产量（鲜重和干重）随着施氮量增加而增加。钟小仙等[7]研究发现，有机无机肥配施，能显著提高狼尾草干物质重量。土壤无机态氮素中的铵态氮和硝态氮是植物主要吸收利用的氮素形式，且两者发生硝化作用和反硝化作用的转化，为植物的生长发育提供氮素营养。土壤酶可以作为催化剂影响土壤各种物质转化过程，其活性的高低可以反映土壤养分转化的强弱，是土壤生物活性和土壤肥力的重要指标[8].沼液作为外源有机肥对作物的产量、品质、土壤理化性质的影响研究已经很多，但其对土壤无机氮库和酶活性的研究尚鲜有报道，本试验以狼尾草为供试植物，研究沼液对其产量、株高、铵态氮、硝态氮和4种酶活性的影响，及所测各指标之间的相关性，为浇灌沼液对培肥土壤氮素及狼尾草的种植提供科学依据。

　　1材料与方法。

　　1.1试验材料。

　　1.1.1试验区概况地点位于福建省建阳市徐市镇林场村长富乳业集团第27牧场，北纬27°22′435″,东经118°09′738″,试验区面积300m2,属亚热带气候，年降雨量1 800mm,年均气温17℃,年日照时间1 850~1 980h,无霜期300d以上，供试土壤为山地红壤，其基本理化性质。

　　1.1.2供试牧草选用'闽牧6号'狼尾草P.americanum×P.purpureum CV.Minmu 6,由福建省农业科学院农业生态研究所牧草品种资源中心提供。该品种2006年通过60Co-γ射线辐射处理杂交狼尾草种子而选育成功，经福建省农作物品种审定委员会审定通过。其具有耐瘠、耐肥、耐湿、适应性强、产量高等特点。适宜在福建等地种植，且宜春季扦插种植。

　　1.2试验设计。

　　试验设5个处理，分别为：N1（对照），对供试狼尾草浇100%自来水+0%沼液；N2,对供试狼尾草浇75%自来水+25%沼液；N3,对供试狼尾草浇50%自来水+50%沼液；N4,对供试狼尾草浇25%自来水+75%沼液；N5,对供试狼尾草浇0%自来水+100%沼液。沼液是长富乳业集团第27牧场奶牛粪尿冲洗物发酵而成，检测得出平均含氮量为0.47g·L-1,全磷含量为0.66mg·L-1,总碳含量为2.10mg·L-1.按施纯氮200kg·hm-2换算出N5处理所需沼液（含氮量为0.47g·L-1）的体积，定为100%沼液量，依次推算出75%（N4）、50%（N3）、25%（N2）和0%（N1）沼液量，余量加水补充到相同体积后浇灌。每处理3次重复，共15个小区，按随机区组排列。每小区间隔1m,用隔板隔开，小区面积为6m2（2m×3m），每小区种植12株（按株行距为0.5m×1m种植）狼尾草。试验开始于2015年2月份，待牧草萌发时开始浇灌，每10d浇灌1次，11月牧草停止生长后停止浇灌。

　　1.3土样采集。

　　分别于2015年5月7日（T1）、8月27日（T2）和11月4日（T3）取土样，在每个小区挖土壤剖面，分别取0~20和20~40cm土层土样100g,存放于4℃冰箱备用，测定土壤铵态氮和硝态氮。取5月7日采集的土样测定0~20cm土层脲酶、蛋白酶、谷氨酰胺酶和天冬酰胺酶活性。

　　1.4测定方法。

　　（1）株高和产量测定：选取具有代表性植株4株，用卷尺分别对株高进行测定并计数；用电子秤测定每小区产量并计数；（2）铵态氮和硝态氮测定：参考鲁如坤[9]的方法测定；（3）酶活性测定：参考关松荫[8]的方法测定。

　　脲酶测定：称取5g鲜土置于50mL塑料瓶中，加入1mL甲苯后静置15min,依次加入10mL 10%尿素溶液和20mL pH为6.7的柠檬酸缓冲液，摇匀后置于37℃恒温箱中培养24h.培养结束后过滤制得母液。吸取1mL母液于25mL比色管中，加入10mL蒸馏水，充分摇匀后依次加入2mL苯酚钠溶液和1.5mL次氯酸溶液，定容摇匀，显色20min,溶液呈蓝色。

　　1h内在紫外分光光度计578nm波长处比色测定。无基质对照以等体积的pH为6.7的柠檬酸缓冲液代替10mL10%尿素溶液，其他操作与试验相同，每个土样设置1个空白对照。

　　蛋白酶测定：称取1g鲜土置于50mL塑料瓶中，加入1mL甲苯后静置15min,依次加入5mL pH 8.1Tris-HCl缓冲液和5mL 2%酪素溶液，摇匀后置于37℃恒温箱中培养24h.培养结束后加入5mL三氯乙酸溶液，摇匀以沉淀蛋白质，过滤制得母液。取1mL母液于25mL比色管中，依次加入5mL Na2CO3溶液，1mL福林试剂使用液，定容于10mL,置于37℃水域中显色10min.在紫外分光光度计700nm波长处比色测定。无基质对照以等体积的pH 8.1Tris-HCl缓冲液代替5mL 2%酪素溶液，每个土样设置1个空白对照。

　　天冬酰胺酶测定：称取5g鲜土置于50mL塑料瓶中，依次加入5mL pH 8.5Tris缓冲液和1mL甲苯后静置15min后，加10mL 3%L-天冬酰胺溶液，摇匀后置于37℃恒温箱中培养24h.

　　结束后加入30mL 1mol·L-1的KCl溶液，振荡30分钟，过滤制得母液。取1mL母液于25mL比色管中，依次加入2.5mL 5%NaOH溶液和1mL 50%酒石酸钾钠溶液以及15mL蒸馏水，摇匀后加入1mL纳氏试剂后定容。显色10min,在紫外分光光度计420nm波长处比色测定。无基质对照以等体积的pH 8.5Tris缓冲液代替10mL 3%L-天冬酰胺溶液，每个土样设置1个空白对照。

　　谷氨酰胺酶测定：以10mL 3%谷氨酰胺溶液代替10mL 3%L-天冬酰胺溶液，其他试验步骤与天冬酰胺酶测定方法一样。

　　1.5数据处理与分析
　　
　　用Microsoft Excel 2010进行数据处理，用IBM SPSS Statistics 19进行单因素方差分析和相关性分析。

　　2结果与分析。

　　2.1对狼尾草株高和鲜重的影响。

　　如表2所示，T1、T2和T3时期，与对照（N1）相比，N2~N5沼液处理狼尾草植株高均呈增加趋势，在T1和T2时期达到显著水平（P<0.05）,T3时期，N3~N5狼尾草株高显著高于对照（P<0.05），N2和对照之间差异不显著（P>0.05）。全年植株高度施沼液处理比不施沼液处理提高15.6%~22.0%;与对照（N1）相比，3个时期N2~N5沼液处理产量都有所提高，全年最高可增产119.0%,增产量为174 754kg·hm-2.

TAG标签： 分析  使用  效果